問:用(yong)HPLC進(jin)行分析時(shi)保留時(shi)間(jian)有時(shi)發生漂移,有時(shi)發生快速(su)變(bian)化(hua),原因何在?如何解(jie)決?
( 答:關于漂移問題:
1、溫度(du)控(kong)制不好,解決(jue)方法是(shi)采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
2、流動相發生變化,解決辦法是(shi)防止流動相發生蒸發、反(fan)應等
3、柱子未平衡好(hao),需對(dui)柱子進(jin)行更長時間的平衡
關于快速變化問(wen)題
1、流速(su)發生變(bian)化,解(jie)決辦(ban)法是重新設定(ding)流速(su),使(shi)之保持穩定(ding)
2、泵(beng)中有(you)氣泡(pao),可(ke)通(tong)過排氣等操作將氣泡(pao)趕(gan)出(chu)。
3、流動(dong)(dong)相不合(he)適,解決辦法為改換流動(dong)(dong)相或(huo)使流動(dong)(dong)相在控制室(shi)內(nei)進行(xing)適當混(hun)合(he)
問:色質聯用中毛細柱的選擇應注意什(shen)么問題?
答:1、柱(zhu)效(xiao)要高
2、熱穩定性(xing)好
化學惰性強(qiang)
具(ju)體(ti)選擇(ze)應注(zhu)意
1、柱極(ji)性(xing)。根據分析樣品選擇不同極(ji)性(xing)的柱子(zi)進(jin)行分析
2、柱子內(nei)徑。內(nei)徑大(da)小決定柱容量(liang)
3、液膜(mo)厚(hou)度(du)(du)。分析(xi)樣品(pin)溫度(du)(du)一(yi)不一(yi)樣,對膜(mo)厚(hou)有(you)不同要(yao)求,溫度(du)(du)高液膜(mo)要(yao)厚(hou),溫度(du)(du)低(di)液膜(mo)要(yao)薄
4、柱(zhu)長(chang)(chang)度。柱(zhu)越(yue)長(chang)(chang),柱(zhu)效越(yue)高,分(fen)離效果(guo)越(yue)好(hao),但也存在吸附問題(ti),柱(zhu)子(zi)(zi)過長(chang)(chang),分(fen)析時間長(chang)(chang),因(yin)此要根據樣品(pin)考慮柱(zhu)子(zi)(zi)長(chang)(chang)度
5、外涂層(柱(zhu)體(ti))的選擇(ze)
6、另外還(huan)有儀器(qi)型號、分析對象等因素
問:液相(xiang)色譜中峰出現拖(tuo)尾或出現雙(shuang)峰的(de)原因(yin)是什么?
答:1、篩板(ban)堵(du)塞或柱(zhu)失效,解決(jue)辦法是反向沖洗柱(zhu)子,替換篩板(ban)或更換柱(zhu)子。
2、存(cun)在干(gan)擾(rao)峰,解決辦法為(wei)使(shi)用較(jiao)長的柱(zhu)子,改換流動相或更換選擇性好的柱(zhu)子
( 問:從那些方面可(ke)以簡單判別毛細管柱子(zi)的熱穩定性好壞?
答:1、分配容量(或容量因子(zi))K,好(hao)的(de)柱(zhu)子(zi)在高溫運行后,分配容量K不應有明顯的(de)下(xia)降(jiang),否則(ze),說明柱(zhu)子(zi)的(de)熱穩(wen)定性不好(hao)。
2、理論塔板(ban)數(shu)n,熱穩(wen)定性好的柱子經受高溫后,理論塔板(ban)數(shu)應基本(ben)保持(chi)恒(heng)定
3、柱子的(de)(de)極性。熱穩定性好的(de)(de)柱子,高溫前后極性變化不(bu)大(da),具體表現為保留指數(shu)I值(zhi)沒有大(da)的(de)(de)變化。
4、噪(zao)聲(sheng)。熱穩定性好的柱(zhu)子在高溫下使用后,噪(zao)聲(sheng)不能增(zeng)加.
5、柱子(zi)的去活層,毛(mao)細管(guan)柱子(zi)涂固定液前內部一般(ban)要(yao)用去活性試劑去活以增加(jia)惰性。質(zhi)量好的毛(mao)細管(guan)柱子(zi)高溫后(hou),去活層
不(bu)應(ying)該變化,表現在對強極性樣(yang)品(pin)或酸堿(jian)性樣(yang)品(pin)的吸(xi)附性不(bu)能增加。